ADN recombinante artificial en SARS-CoV-2
Tema: Rescate del SARS-CoV-2 de un
cromosoma artificial bacteriano único (1).
Objetivo: Facilitar el estudio del SARS-CoV-2 y el desarrollo de profilácticos y
terapéuticos para el tratamiento de COVID-19 (1).
Gen o secuencia a clonar: ARN viral del SARS-CoV-2 USA-WA1 / 2020 con 29,903 nucleótidos basado en el uso de un cromosoma artificial bacteriano (BAC) se obtiene ADNc infeccioso (1).
Enzimas de
restricción: Kasl,
Pacl, Mlul, BstBl, BamHl (1).
Enzima ligasa: No específica (1).
Vector: pBeloBAC11 (1).
Célula receptora:
Células Vero E6 (1).
Mecanismo de transferencia o inserción del gen: Transfección (1).
Métodos de identificación de clones: Cultivo, secuenciación, ensayo de inmunofluorescencia (IFA), ensayo de placa e inmunotinción y RT-PCR (1).
ADN recombinante en la naturaleza
La recombinación
en la naturaleza se puede ver presente en las bacterias, las mismas que para
cambiar su dotación genética realizan la transferencia de fragmentos de ADN de
unas a otras con la posterior recombinación de los fragmentos adquiridos en el
cromosoma o en los plásmidos de las bacterias receptoras (2). En la
recombinación de tipo homóloga el fragmento de ADN aceptado es muy similar a
una parte del genoma de la bacteria y, tras situarse al lado, se intercambia
con él por un mecanismo de rotura, entrecruzamiento y reunión de sus cadenas de
ADN (2). La transferencia previa a este tipo de recombinación puede ocurrir mediante:
transformación, transducción o por conjugación (2). En el caso de la
recombinación no homóloga los transposones o integrones pueden integrarse en
diversos puntos del cromosoma o en los plásmidos de una bacteria sin necesidad
de encontrar fragmentos homólogos (2).
Referencias Bibliográficas:
1. Ye C, Chiem K, Park JG, Oladunni
F, Platt RN 2nd, Anderson T, Almazan F, de la Torre JC, Martinez-Sobrido L.
Rescue of SARS-CoV-2 from a Single Bacterial Artificial Chromosome. mBio
[Internet]. 2020 [citado el 06 de febrero de 2021]; 11 (5): e02168-20. Disponible
en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32978313/
2. Celis Bustos, Yamile Adriana,
Rubio, Vivian Vensa, Camacho Navarro, María Marcela, Perspectiva histórica del
origen evolutivo de la resistencia a antibióticos. Revista Colombiana de
Biotecnología [Internet]. 2017 [citado el 06 de febrero de 2021]; 19 (2): 105-117.
Disponible en: https://www.redalyc.org/pdf/776/77654661011.pdf
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